自誕生以來(lái)，CRISPR-Cas9這把"基因魔剪"雖然掀起了生命科學(xué)研究的革命性浪潮。然而，面對(duì)那些"油鹽不進(jìn)"的難轉(zhuǎn)染細(xì)胞，特別是原代免疫細(xì)胞，這把基因魔剪卻常常無(wú)處施展。
現(xiàn)在，這個(gè)難題終于迎來(lái)突破性解決方案！西湖凝聚體攜手西湖大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)重磅推出ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯試劑盒。這款全球首個(gè)基于內(nèi)源蛋白凝聚體的轉(zhuǎn)染試劑，采用先進(jìn)的mRNA遞送技術(shù)，開創(chuàng)了非病毒、非電轉(zhuǎn)、非脂質(zhì)體的全新遞送策略，不受核酸大小限制，高效遞送Cas9 mRNA，讓原代免疫細(xì)胞這樣難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的基因編輯不再是難題。基于ProteanFect進(jìn)行免疫細(xì)胞基因編輯的成果，也將在本周舉行的美國(guó)血液學(xué)會(huì)（ASH）年會(huì)上做口頭報(bào)道，期待與各位同行進(jìn)行交流。
圖1：使用ProteanFect CRISPRMax Cas9試劑盒在人原代T細(xì)胞和小鼠原代T細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)高效基因編輯，基因編輯效率范圍為67%-88%。
CRISPR編輯系統(tǒng)遞送方式對(duì)比
突破性創(chuàng)新：基于ProteanFect內(nèi)源蛋白遞送的mRNA-Based CRISPR Cas9技術(shù)
創(chuàng)新原理
面對(duì)現(xiàn)有遞送方法的種種局限，西湖凝聚體開發(fā)出基于生物分子凝聚體的全新遞送技術(shù)——ProteanFect。這項(xiàng)技術(shù)的核心在于充分利用生物凝聚體的天然生物學(xué)機(jī)制：ProteanFect蛋白分子能夠在體外與核酸自組裝成高度規(guī)律的球體結(jié)構(gòu)（見圖2）。
圖2：ProteanFect蛋白分子與mRNA可在體外自組裝形成蛋白納米顆粒。
這種自組裝而成的ProteanFect-核酸復(fù)合物能夠通過(guò)細(xì)胞的主動(dòng)攝入高效進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，迅速釋放核酸分子，實(shí)現(xiàn)基因表達(dá)，同時(shí)天然降解其余蛋白（圖3）。
圖3：ProteanFect核酸遞送原理示意圖
ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯方式
1. 通過(guò)共轉(zhuǎn)染Cas9 mRNA與sgRNA，成功表達(dá)Cas9蛋白。
2. Cas9蛋白與sgRNA在細(xì)胞內(nèi)自組裝形成RNP復(fù)合物。
3. RNP復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞核并實(shí)現(xiàn)高效基因編輯。
圖4：ProteanFect基因編輯方式原理示意圖
ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯卓越優(yōu)勢(shì)
高效性能- 轉(zhuǎn)染效率可達(dá)70%-95%，可同時(shí)遞送多種核酸，共表達(dá)率超90%，適用于人源和小鼠原代免疫細(xì)胞
卓越安全性- 非病毒、非電轉(zhuǎn)、非脂質(zhì)體設(shè)計(jì) - 基于內(nèi)源蛋白，生物相容性極 佳 - 顯著降低細(xì)胞損傷
操作便捷- 標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)流程 - 無(wú)需復(fù)雜的預(yù)處理步驟 - 可重復(fù)性高
系統(tǒng)靈活 – 不受細(xì)胞數(shù)量限制，從103– 108次細(xì)胞都可以轉(zhuǎn)染
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